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Updated: Jul 4, 2025

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

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Published on: June 9, 2014

记录十倍更大的I_Kr导电量与自动补丁紧使用等价Cs⁺解决方案

Meye Bloothooft¹, Bente Verbruggen¹, Fitzwilliam Seibertz^2,3,4,5

¹Department of Medical Physiology, Division of Heart and Lungs, University Medical Center Utrecht, Utrecht, Netherlands.

Frontiers in physiology

|February 8, 2024

概括

在自动补丁系统中使用 (Cs+) 而不是 (K+) 显著放大了hERG通道电流,改善了对心律失常的药物查. 这种方法增强了人类诱导的多能干细胞衍生的心肌细胞的测量.

科学领域:

心血管药理学心血管药理学
离子通道生理学离子通道生理学
药物发现药物发现药物发现

背景情况:

快速延迟的整流器电流 (I_Kr) 对于心脏再极化至关重要,并与药物诱导的心律失常有关.
在人类诱导的多能干细胞衍生心肌细胞 (hiPSC-CM) 中测量I_Kr是具有挑战性的,因为电流密度低.
负责I_Kr的hERG通道,可以传导K⁺和Cs⁺的离子.

研究的目的:

评估使用等分 (Cs⁺) 作为电荷载体,用于使用自动补丁系统测量hERG电流.
为了比较基于Cs+和K的hERG电流测量,在中国仓鼠卵巢 (CHO) -hERG细胞和hiPSC-CM.
评估已知的药物对Cs⁺-和K⁺介导的hERG电流的影响.

主要方法:

使用自动补丁电生理学.
在测量hERG电流时,使用等分Cs⁺或K⁺溶液.
四种药物的抑制和激活作用 (dofetilide, desipramine,moxifloxacin,LUF7244) 对hERG电流的Cs和Ks条件进行了比较.

主要成果:

与K解决方案相比,等分Cs⁺解决方案的hERG通道导电率大约增加了十倍.
药物对Cs⁺介导的hERG电流的影响在很大程度上反映了K⁺介导的电流所观察到的效果.
在hiPSC-CM中,基于Cs的hERG导电量明显大于基于K的导电量,并显示出类似的抑制模式.

结论:

在自动补丁系统中采用等分Cs⁺为I_hERG评估提供了一种新而敏感的方法.
这种方法对于高通量药物查特别有价值,特别是对于具有小I_Kr电流密度的细胞类型.
基于Cs+的方法有助于快速评估药物对hERG电流的影响,有助于预测心脏安全.

关键词:

在 Cs++ Cs+ 中.自动补丁的自动化补丁心脏电生理学心脏电生理学行为准则是指行为准则.药物药物药物药物药物药物希尔格 (HERG) 是一个这就是hiPSC-CM.离子通道离子通道离子通道

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