SWATH-MS作为CHO宿主细胞蛋白质识别和量化策略,支持对mAb净化平台的表征

科学领域:

• 生物制药制造业 生物制药制造业
• 分析化学 分析化学
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 宿主细胞蛋白 (HCP) 是生物治疗生产中的关键杂质,可能影响产品质量和患者安全.
• 像ELISA这样的传统方法在识别和量化特定的HP的限制,这些HP可能会在下游处理中持续存在.

研究的目的:

• 评估所有理论碎片离子光谱 (SWATH) 的顺序窗口获取策略,作为HCP评估的直角方法.
• 用单克隆抗体 (mAb) 净化平台来描述HCP清除,并评估不同树脂的性能.

主要方法:

• 基于SWATH的蛋白质组的应用,用于高通量HCP的识别和量化.
• 实验设计 (DOE) 研究,评估两种抛光树脂之间的HCP清除.
• 使用合成重标签校准曲线,对高风险医疗保健人员进行绝对量化.

主要成果:

• SWATH成功实现了高通量个体HCP的识别和量化.
• 对于特定高风险的医疗保健工作者,已达到定量化的低极限 (1.8和4.2 ppm).
• 证明了使用平均校准曲线对其他医疗保健人员进行分析的能力,提高了流程理解.

结论:

• SWATH-MS是一个强大的工具,用于生物工艺开发中全面的HCP评估.
• 这种方法可以同时监测和量化个别医疗保健人员,从而更好地了解他们的清算机制.
• 该方法支持关键质量属性监测,并增强生物治疗制造工艺控制.