一种新型的多模态阴子交换膜,用于从Pichia pastoris supernatant中净化单链变量片段

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 化学工程是化学工程的重要组成部分.
• 膜科学 膜科学 膜科学

背景情况:

• 在Pichia pastoris的发酵过程中,在高导电性的超体中产生单链可变碎片 (scFv).
• 传统的净化需要缓冲器交换,增加复杂性和成本.
• 需要新的离子交换膜来直接捕获产品.

研究的目的:

• 为了评估一种新的盐耐受性阴离子交换膜与多式联体 (MMC-MPCA) 用于scFv净化.
• 为了确定动态结合能力 (DBC),产量和纯度的最佳条件.
• 评估直接从高导电性发酵超体中捕获产品的可行性.

主要方法:

• 使用2-mercaptopyridine-3-carboxylic acid (MMC-MPCA) 制备一个阴离子交换膜.
• 膜性能的表征 (pH,停留时间,负载,度).
• 来自Pichia pastoris supernatant.的scFv的绑定和放出净化.

主要成果:

• 在pH 5.5和1分钟的停留时间 (RT) 达到39.06 mg/mL的最高DBC.
• 降低pH值低于5.0显著降低DBC至2.5毫克/毫升.
• 180mg/mL/min的高生产率在0.2分RT时实现,没有显著的DBC损失.
• 在优化条件下,产品的纯度从83%提高到92-95%.
• 在更短的RT时重复使用时观察到的膜污染.

结论:

• 在MMC-MPCA膜是有效的直接scFv捕获从高导电性Pichia pastoris超.
• 优化条件产生高纯度和生产率,可能消除缓冲区交换步骤.
• 需要进一步研究膜污染和scFv稳定性.