相关实验视频
Updated: Jul 3, 2025

Identifying Amino Acid Overproducers Using Rare-Codon-Rich Markers
Published on: June 24, 2019
在哺乳动物细胞表达的治疗性蛋白候选物中停止-Codon阅读
Zhongqi Zhang1, Neelam Khanal1, Andrew B Dykstra1
1Process Development, Amgen Inc. Thousand Oaks, CA 91320, USA.
在治疗性蛋白质中,停止密码子读透是常见的,影响产品质量. 优化在停止密码子附近的DNA序列和监测读透对于生物制药开发至关重要.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 生物制药开发 生物制药开发
背景情况:
- 重组治疗性蛋白质在现代医学中至关重要.
- 确保蛋白质的完整性和准确的终止对于疗效和安全至关重要.
- 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞被广泛用于生产这些蛋白质.
研究的目的:
- 在重组治疗性蛋白质候选物中调查停止密码子读透的患病率和特征.
- 为了确定影响停止密码子读透的因素.
- 突出治疗性蛋白质开发的影响.
主要方法:
- 使用液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 绘制片映射.
- 从多个CHO细胞克隆中获得的48种重组治疗性蛋白质候选物的分析.
- 定量化停止密码子的阅读度.
主要成果:
- 在治疗性蛋白质候选物中,停止密码子读透是经常发生的事件,在大多数样本中观察到.
- 读透率从0.001%以下到大约1%不等.
- 读透倾向受特定的停止编码子 (UAA,UAG,UGA) 和周围的核酸序列的影响.
- 错误结合的氨基酸 (氨酸,谷氨酸,氨酸,氨酸,氨酸,氨酸) 可以根据代码和摇摆不匹配进行预测.
结论:
- 停止密码子读透是CHO细胞表达的治疗性蛋白质中常见且显著的转录后事件.
- 了解序列上下文和编码子识别机制是预测和潜在地减轻读透的关键.
- 检测和控制停止密码子的读透对于优化DNA序列和确保治疗产品在开发过程中的质量至关重要.
更多相关视频
11:47Residue-specific Incorporation of Noncanonical Amino Acids into Model Proteins Using an Escherichia coli Cell-free Transcription-translation System
Published on: August 1, 2016
10:31Residue-Specific Exchange of Proline by Proline Analogs in Fluorescent Proteins: How "Molecular Surgery" of the Backbone Affects Folding and Stability
Published on: February 3, 2022
相关概念视频
Leaky Scanning
From DNA to Protein
Improving Translational Accuracy
Transcription Attenuation in Prokaryotes
There are several different mechanisms used to attenuate transcription. In ribosome mediated...