在大规模的人类大脑成像中,光片光显微镜的光学清除和标记
Danila Di Meo1, Josephine Ramazzotti1, Marina Scardigli2
1European Laboratory for Non-linear Spectroscopy (LENS), University of Florence.
Journal of visualized experiments : JoVE
|February 12, 2024
概括
研究人员开发了SHORT协议,用于快速清除和标记人类大脑. 这种方法可以使用光片光显微镜进行大脑部分的高分辨率3D重建.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 生物技术是生物技术.
- 显微镜的使用方法
背景情况:
- 为高分辨率成像处理死后人类大脑是具有挑战性的,因为大小和复杂性.
- 现有的清除技术与人类大脑的复杂结构作斗争.
研究的目的:
- 介绍一项用于高效3D重建人类大脑体积的新协议.
- 为了能够对大脑部分进行高分辨率成像.
主要方法:
- 采用了SWITCH - H2O2 - 抗原检索 - 2,2'-thiodiethanol (TDE) [SHORT]组织转化协议.使用了SWITCH - H2O2 - 抗原检索 - 2,2'-thiodiethanol (TDE) [SHORT]组织转化协议.
- 同时处理多个厚的大脑部分,用于清除和多重标签.
- 光片光显微镜 (LSFM) 用于对清除的切片进行序列成像.
主要成果:
- 通过SHORT协议,可以快速和均地清除和多重标记厚厚的脑切片.
- 在白质和灰质中确定了神经元子群.
- 高分辨率,多通道成像允许快速3D重建大体积区域.
结论:
- 合并的SHORT协议和LSFM提供了一种高通量方法,用于全面的人类大脑结构特征.
- 这种方法显著减少了高分辨率3D大脑重建所需的时间.
- 能够对大脑体积中的细胞架构进行详细分析.
