在冷保存内皮细胞单层的冷保存过程中,冷保存引起的延迟损伤和细胞类型特异性反应
MingHan Yu1, Leah A Marquez-Curtis1, Janet A W Elliott1
1Department of Chemical and Materials Engineering, University of Alberta, Edmonton, AB, T6G 1H9, Canada; Department of Laboratory Medicine and Pathology, University of Alberta, Edmonton, AB, T6G 1C9, Canada.
使用新方案冷保存内皮细胞单层,没有显示人静脉和猪角膜细胞的直接或延迟损伤. 这种经过验证的方法确保了解后的细胞活力和生长,并指出了细胞特异性反应.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 低温生物学 低温生物学
- 组织工程是组织工程.
背景情况:
- 内皮细胞单层的冷保存对于桥梁细胞悬浮和组织保存至关重要.
- 在悬浮细胞和单层细胞之间存在不同的结机制.
- 之前已经开发了单层冷保存的协议.
研究的目的:
- 验证内皮细胞单层 (人类脉内皮细胞和猪角膜内皮细胞) 的冷保存协议.
- 评估冷保存的内皮单层中解后的即时和延迟损伤反应.
- 为了研究细胞类型对冷保存的特定反应.
主要方法:
- 内皮单层 (HUVEC和PCEC) 使用缓慢冷却协议 (-1°C/分钟) 进行冷保存,并在-40°C后沉入液中.
- 低温保护剂包括5%的二甲基硫氧化物,6%的基乙烯粉和2%的氏丁硫酸盐.
- 在解后立即评估膜完整性和细胞活力,并在24小时培养后评估细胞活力,并探讨了不同的沉降温度.
主要成果:
- 在最佳的-40°C下降时,HUVEC和PCEC单层在24小时培养过程中没有显著的即时或延迟损伤.
- HUVEC单层保持了其增长率,而PCEC单层在解后表现出增强的增长率.
- 低于最佳的高温冲击在PCEC中引起了即时伤害,在HUVEC中引起了即时和延迟伤害.
结论:
- 已建立的冷保存协议已被验证为HUVEC和PCEC单层,确保解后的生命力和生长.
- 鉴定了细胞类型对冷保存反应的特异性差异,特别是延迟损伤.
- 这些发现支持使用该协议来保护内皮细胞单层.
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