全基因组测序揭示了使用CRISPR-Cas9和体细胞核转移生成的MC1R编辑猪中的罕见非目标突变
Zhenyang Li1, Jin Lan1, Xuan Shi1
1State Key Laboratory of Biocontrol, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou, People's Republic of China.
The CRISPR journal
|February 14, 2024
概括
基因编辑工具CRISPR-Cas9有效地创造了由黑色皮质素1受体 (MC1R) 编辑的猪. 基因组测序揭示了最小的目标外突变,这表明CRISPR-Cas9是安全的通过SCNT创建基因编辑猪.
科学领域:
- 遗传学和基因组学 遗传学和基因组学
- 动物生物技术动物生物技术
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 克里斯普尔-Cas9系统提供了一种具有成本效益和用户友好的方法,用于生成转基因动物模型.
- 脱位突变是CRISPR-Cas9技术广泛应用的一个潜在问题.
- 在猪中编辑Melanocortin 1受体 (MC1R) 基因与农业和生物医学研究有关.
研究的目的:
- 评估CRISPR-Cas9系统在基因编辑猪中的脱效应.
- 使用体细胞核转移 (SCNT) 创建一个由黑色皮质素1受体 (MC1R) 编辑的猪模型.
- 评估CRISPR-Cas9在产生基因编辑牲畜方面的安全性和有效性.
主要方法:
- 实体细胞核转移 (SCNT) 用于从CRISPR-Cas9修饰的猪细胞产生猪.
- 在MC1R编辑的猪及其野生类型克隆兄弟姐妹身上进行了全基因组测序.
- 分析的重点是识别单核酸变异和小插入/删除 (indels) 在整个基因组.
主要成果:
- 在两个MC1R编辑猪的基因组中,只检测到一个候选非标INDEL.
- 该研究证实了猪模型中MC1R基因的成功编辑.
- 全基因组分析表明,意外遗传修饰的频率很低.
结论:
- 通过SCNT在猪中进行CRISPR-Cas9调解的基因编辑显示出最小的目标外影响.
- 安全性概况表明,CRISPR-Cas9是为研究和农业目的创造基因编辑猪的可行工具.
- 目标之外的担忧可能不会显著阻碍CRISPR-Cas9在基于SCNT的猪模型中的实际应用.
