使用高敏度CRISPR激活选平台发现受体-连接体相互作用
Liping Yang1, Timothy P Sheets2, Yang Feng1
1Tumor Angiogenesis Unit, Mouse Cancer Genetics Program (MCGP), National Cancer Institute (NCI), NIH, Frederick, MD 21702, USA.
Science advances
|February 14, 2024
概括
一个新的选平台可以识别未知的蛋白质相互作用. 这种通过4-1BB相互作用调节T细胞激活的siglec-4的发现促进了免疫检查点抑制剂药物开发.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 大多数批准的药物向细胞表面或分泌的蛋白质.
- 受体脱化仍然是一个挑战,有许多未知的蛋白质结合伙伴.
- 识别这些相互作用对于开发新疗法至关重要.
研究的目的:
- 开发一种先进的选平台,用于识别细胞外受体-连接体相互作用.
- 克服目前用于弱蛋白相互作用的选方法的局限性.
- 为了发现新型的结合伙伴对非特征的受体.
主要方法:
- 结合CRISPR-CAS9基因激活 (CRISPRa) 与基于高性珠子的选择.
- 集成的序列丰富和流细胞计,以提高灵敏度.
- 应用该平台研究免疫检查点抑制剂相互作用.
主要成果:
- 成功地确定了siglec-4和辅助刺激受体4-1BB.之间的一种低亲和度的跨相互作用.
- 证明siglec-4调节T细胞激活.
- 对弱相互作用的选灵敏度大大提高.
结论:
- 开发的基于CRISPRa的查平台在识别细胞外相互作用方面非常有效.
- 这个平台可以加快新型受体-连接体合作伙伴的发现.
- 这些发现为开发下一代治疗方法铺平了道路,包括新的免疫检查点抑制剂.
