先进的生物制造和评估腺相关病毒
Kai Chen1, Seulhee Kim2, Siying Yang1
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering, The Ohio State University (OSU), 151 W Woodruff Ave, Columbus, OH, 43210, USA.
Journal of biological engineering
|February 15, 2024
概括
这项研究提出了一个可扩展的生物制造平台,用于生产和净化重组腺相关病毒 (rAAV) 基因治疗载体. 优化的过程可以实现多个AAV血清型的高标位和恢复率,从而使遗传疾病的潜在治疗成为可能.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 病毒载体生产病毒载体生产
背景情况:
- 重组腺相关病毒 (rAAV) 是基因疗法的关键载体,特别是在罕见的遗传疾病中.
- 现有的生产方法面临着各种AAV血清型的可扩展性和效率方面的挑战.
研究的目的:
- 开发一种新的,可扩展的生物制造工艺,用于高产量的生产和多种rAAV血清型 (AAV2,5,DJ,DJ8) 的净化.
- 为基因传递应用建立适用于各种AAV载体的通用平台.
主要方法:
- 优化悬浮细胞培养过程在摇瓶,旋转瓶和水箱生物反应器中.
- 开发和完善基于液态色谱的净化协议,实现高回收率.
- 经过验证的AAV生产使用了体外测试 (西方涂抹,显微镜,生物发光) 和小鼠模型中的体内研究.
主要成果:
- 在7.52-8.14×10^10vg/mL.之间实现了高的rAAV标位.
- 在四种AAV血清型中,已证明净化恢复率为85-95%.
- 在瘤异种移植小鼠模型中确认成功的体内基因表达和感染.
结论:
- 已经成功建立了一个强大的,可扩展和通用的生物制造平台,用于rAAV的生产,澄清和净化.
- 该平台支持用于基因治疗的临床级rAAV载体的高效生成.
- 这些发现为rAAV在治疗遗传疾病中的更广泛应用铺平了道路.
