人类心肌细胞中MYH7变体的多重功能评估
Clayton E Friedman1,2,3, Shawn Fayer4, Sriram Pendyala4
1Institute for Stem Cell and Regenerative Medicine, University of Washington, School of Medicine, Seattle (C.E.F., W.-M.C., A.L., L.T., L.S.C., A.M., D.A., E.C.J., C.E.M., K.-C.Y.).
Circulation. Genomic and precision medicine
|February 16, 2024
概括
这项研究开发了一种使用人类干细胞测试MYH7基因变异的新方法,从而提高对多变性心肌病的理解,并减少患者中未知的遗传变异.
科学领域:
- 心血管遗传学 心血管遗传学
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 分子心脏病学分子心脏病学
背景情况:
- 在MYH7 (髓酸重链7) 中的致病变体会导致过度缩性心肌病变.
- 大多数MYH7误解变异是未知的意义,阻碍临床诊断.
- 以前的方法在人类诱导的多能干细胞 (hiPSCs) 中进行深度突变扫描时缺乏效率.
研究的目的:
- 开发一种使用hiPSC衍生心肌细胞的MYH7变体深度突变扫描方法.
- 在疾病相关的细胞模型中评估MYH7误解变异的功能影响.
- 为了减少对患者和临床医生的未知意义的变异负担.
主要方法:
- 通过使用CRISPRa.a.生成了一个hiPSC库,包含113个MYH7编码子变体.
- 差异化hiPSCs为心肌细胞进行功能评估.
- 通过大规模并行测序评估β-肌素重链 (β-MHC) 变异丰度和心肌细胞存活率.
主要成果:
- 对β-MHC丰度和心肌细胞存活率的多重评估准确地区分了致病性与同名MYH7变体.
- 对于4种未知意义的变体和58种新型MYH7误解变体,生成了功能数据.
- 已确定的β-MHC蛋白质损失在患有多变性心肌病的心脏中,患有致病性MYH7变体.
结论:
- 利用hiPSC衍生的心肌细胞进行MYH7误解变异的多重评估.
- 开发了表型化策略,使得临床可操作基因的深度突变扫描成为可能.
- 这种方法可以减少未知意义的变异的临床负担.
