高性能生产工艺开发和扩展反TSLP纳米体的扩展

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 纳米体 (Nbs) 是有价值的单域抗体,在治疗和诊断中具有广泛的应用.
• 胸膜流体淋巴蛋白 (TSLP) 是一种关键的细胞因子,在障碍物表面的2型免疫反应中起作用.

研究的目的:

• 建立和扩大抗TSLP纳米体 (Nb3341) 的强大的表达和净化过程.
• 优化关键过程参数,以实现高效的大规模纳米体生产.

主要方法:

• 普莱克特-伯曼设计 (PBD) 用于确定优化关键参数.
• 优化是在7升生物反应器中进行的,随后扩大到100升.
• 钻石混合A和钻石MMC树脂被选择用于捕获和抛光步骤.

主要成果:

• 确定了最佳的诱导条件:24°C,8.5毫升/升/小时的甲醇料,pH值6.5.
• 100L规模的生产产生了高纯度的22.97g/L标位 (98.7%的SEC-HPLC,95.7%的AEX-HPLC).
• 获得了低水平的宿主细胞蛋白 (HCP) 和HCD残留物 (分别为4ppm和1ppg/mg).

结论:

• 开发的过程是可行的,稳定的,并可用于商业纳米体生产的可扩展.
• 这种方法为从实验室到商业规模的纳米体生产过渡提供了一种竞争性的方法.
• 优化表达和净化对于高度,高纯度的纳米体制造至关重要.