[通过位点定向突变发生优化的信号对仿真抗原受体T细胞的功能的影响]
Yu Liu1, Fan Li2, Huiyun Dai1
1Institute of Biology and Medicine, College of Life Science and Health, Wuhan University of Science and Technology, Wuhan 430081, Hubei, China.
Sheng wu gong cheng xue bao = Chinese journal of biotechnology
|February 19, 2024
概括
在仿真抗原受体 (CAR) 中优化信号 (SP) 增强了CAR-T细胞治疗. 修改SP序列提高了CD19-CAR-T细胞传染效率和瘤杀伤能力.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 信号 (SP) 对于CAR-T细胞疗法中仿真抗原受体 (CARs) 的正确功能至关重要.
- 优化SP序列可能会增强CAR表达和T细胞疗效.
- CD19-CAR-T细胞是一种有前途的免疫疗法,用于向CD19表达癌症.
研究的目的:
- 通过局部定向突变发生来优化CD19-CAR-T细胞的信号序列.
- 研究修改信号对CAR表达,T细胞转染效率和抗瘤活性的影响.
- 评估信号优化的对细胞因子分泌的影响.
主要方法:
- 使用基因合成和分子克隆,使用野生型 (SP-wtY) 和突变信号 (SP-muK,SP-muR) 构建CAR载体.
- 病毒包装和T细胞的转导.
- 通过流式细胞计量评估T细胞传染效率.
- 使用素释放试验评估瘤杀伤活性.
- 使用ELISA测量细胞因子分泌 (IFN-γ,TNF-α).
主要成果:
- 成功构建了用野生型和突变信号编码CD19-CAR的lentiviral载体.
- 对SP-wtY,SP-muK和SP-muR的传染效率分别为33.9%,35.5%和36.8%.
- 与SP-muK和SP-wtY组相比,SP-muR组表现出明显增强的瘤杀伤作用.
- 在SP-muR组中的CAR-T细胞显示IFN-γ和TNF-α的分泌量显著增加.
结论:
- 增加信号的N端正电荷可以提高CAR表达效率.
- 优化的信号促进了CAR-T细胞对CD19阳性细胞的增强杀死.
- 这些发现为优化CAR结构提供了基础,以改善癌症免疫治疗中的临床应用.
