一种基于流细胞计的高通量技术,用于选整合素抑制药物
Ziming Cao1, Matthew J Garcia2, Larry A Sklar3
1Department of Immunology, School of Medicine, UConn Health.
Journal of visualized experiments : JoVE
|February 19, 2024
概括
这项研究提出了一种新的高通量方法,用于识别抑制中性粒细胞β2整合素激活的小分子. 这种方法有助于通过向关键免疫细胞粘附分子来开发炎症疾病的治疗方法.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
背景情况:
- β2整合素是关键的白细胞粘附分子,参与免疫反应和炎症性疾病.
- 中性细胞β2整合素激活对于它们的扩散至关重要,并在感染和炎症中发挥作用.
- 向β2整合素激活为与中性粒细胞相关的炎症状况提供了治疗策略.
研究的目的:
- 开发和验证一种高通量选 (HTS) 方法,用于识别β2整合素激活的小分子抗剂.
- 为了利用形状变化报告抗体和流细胞计量来量化β2整蛋白激活.
- 建立适用于其他基于抗体的HTS测定的协议.
主要方法:
- 使用一种单克隆抗体 (mAb24),该抗体能够识别β2整合素的高亲和状态.
- 采用高通量流量细胞计与自动化384井板处理.
- 在3小时内评估了320种化学物质对fMLP刺激的人类初级中性粒细胞中的β2整合素激活的抑制作用.
主要成果:
- 成功建立了一个用于量化中性粒细胞β2整合素激活的协议.
- 证明了对320种化学物质库进行β2整合素抑制剂选的可行性.
- 确定了潜在的小分子,以β2整合素或它们的上游信号通路为目标.
结论:
- 开发的HTS方法有效地识别了β2整合素激活的对抗剂.
- 该协议为药物发现提供了宝贵的工具,针对中性粒细胞介导的炎症性疾病.
- 该方法可以适应选其他细胞表面受体激活状态.
