通过基于ARTP突变发生的高通量选方法,增强Saccharomyces cerevisiae中的 (2S) - 纳灵生产
Qian Gao1,2,3, Song Gao1,2, Weizhu Zeng1,2
1Engineering Research Center of Ministry of Education On Food Synthetic Biotechnology, Jiangnan University, 1800 Lihu Road, Wuxi, 214122 Jiangsu China.
3 Biotech
|February 21, 2024
概括
研究人员开发了一种新的高通量选方法,以改善 (2S) - 纳灵宁的生产,这是一种有价值的黄类前体. 这种方法成功地发现了一种突变菌株,该菌株显著增加了 (2S) - 纳灵宁的产量.
科学领域:
- 代谢工程是代谢工程.
- 生物技术是生物技术.
- 合成生物学 合成生物学
背景情况:
- (2S) - 纳灵宁是一种重要的二黄化合物前体,用于黄化合物合成,具有重要的药用特性.
- 之前在Saccharomyces cerevisiae中的代谢工程工作已经确定了葡萄糖到2S-Naringenin通路.
- 提高 (2S) - 纳灵宁生产的挑战源于该途径的长度和未知的竞争性途径基因.
研究的目的:
- 开发一种新的高通量选 (HTS) 方法,用于识别增强 (2S) - 纳灵宁生产者.
- 为了克服增加 (2S) - 纳灵宁产量的代谢修饰的局限性.
- 提高对高滴度微生物菌株的查效率.
主要方法:
- 建立了一种新的HTS方法,将色度反应与随机突变发生结合起来,使用大气室温等离子体 (ARTP).
- 选了大约9600种突变,以确定改进的 (2S) - 纳灵宁生产者.
- 评估了在摇瓶和生物反应器培养物中选择的突变菌株的性能.
主要成果:
- 通过使用开发的HTS方法,成功识别了一种高产突变菌株 (B7-D9).
- 在摇瓶培养中, (2S) - 纳灵宁的标位增加了52.3%.
- 在5L生物反应器中, (2S) - 纳灵宁位显著增加了19.8%.
结论:
- 成功建立了一种高效的HTS方法,用于选高度 (2S) - 纳灵宁生产者.
- 开发的方法显著提高了对微生物代谢物生产的查效率.
- 这项研究提供了有价值的见解和解决方案,以提高 (2S) - 纳灵宁和类似化合物的生产.
