基于病毒的表达载体的构建,用于植物中高水平生产人类干扰素α2b
Yana Sindarovska1, Mykola Kuchuk2
1Department of Genetic Engineering, Institute of Cell Biology and Genetic Engineering of NAS of Ukraine, Akad. Zabolotnogo Str., 148, Kyiv, 03148, Ukraine. sindarovskaya@ukr.net.
Applied microbiology and biotechnology
|February 23, 2024
概括
基于土豆病毒X的载体使植物能够有效地生产人类干扰素α2b. 尼科蒂安娜 (Nicotiana benthamiana) 植物产生的这种治疗蛋白质含量很高,为制药生产提供了一个有前途的替代品.
科学领域:
- 植物生物技术 植物生物技术
- 分子生物学分子生物学
- 生物制药生产 生物制药生产
背景情况:
- 人类干扰素 (hINF) alfa 2b是治疗型肝炎,乙型肝炎和某些癌症的关键药物.
- 对hINF alpha 2b的高效和可扩展的生产方法对于其临床应用至关重要.
- 基于植物的表达系统为重组蛋白质生产提供了一个潜在的成本效益和可扩展的平台.
研究的目的:
- 开发和评估用于生产人类干扰素α2b的植物表达系统.
- 利用土豆病毒X (PVX) 基因组元素来构建高效的基因表达载体.
- 为了比较不同植物物种中hINFα2b的表达水平.
主要方法:
- 使用土豆病毒X (PVX) 基因组元素来携带infα2b基因,创建了基因结构.
- 在Nicotiana benthamiana和Ocimum basilicum (甜) 中使用了农细菌介导的过渡基因表达.
- 表达水平以每克新鲜叶重量 (mg/g FW) 的毫克和总可溶性蛋白质 (TSP) 的百分比来量化.
主要成果:
- 与Ocimum basilicum相比,Nicotiana benthamiana中的infα2b的过渡表达更有效.
- 在N. benthamiana中,平均产量达到0.56 mg/g FW (6% TSP),最高为1.2 mg/g FW (9% TSP).
- 基于PVX的表达产生了大约80倍的hINFα2b比一个简单的35S促进器驱动磁带.
结论:
- 基于PVX的表达载体促进了植物中infα2b基因高效的短暂表达.
- 尼科蒂亚娜本塔米亚纳是适合高水平生产复合人类干扰素α2b的宿主.
- 这项研究表明,植物生物制药生产取得了重大进展,实现了临床重要蛋白质的大量产量.
