诱导人类诱导多能干细胞衍生内皮细胞的成熟过程的方法,以生成一个强大的模型
Suzan de Boer1, Sebastiaan Laan1, Richard Dirven1
1Division of Thrombosis and Hemostasis, Department of Internal Medicine, Einthoven Laboratory for Vascular and Regenerative Medicine, Leiden University Medical Center, Leiden, The Netherlands.
PloS one
|February 23, 2024
概括
人类诱导的多能干细胞衍生的内皮细胞 (hiPSC-ECs) 显示出成熟的潜力,但与·维勒布兰德因子 (VWF) 生产作斗争. 延长培养时间 (>30天) 可以改善VWF水平和Weibel-Palade体结构,尽管细胞活力下降.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 内皮细胞生物学 内皮细胞生物学
- 血管生物学 血管生物学
背景情况:
- 人类诱导的多能干细胞衍生的内皮细胞 (hiPSC-ECs) 呈现内皮标记物,但缺乏成熟的表型.
- 低·维勒布兰德因子 (VWF) 生产和圆形的韦贝尔-帕拉德体 (WPB) 表明hiPSC-ECs的不成熟.
研究的目的:
- 为了提高hiPSC-ECs的成熟.
- 在hiPSC-ECs中增加VWF表达和产量.
主要方法:
- 而hiPSC-ECs与健康的捐赠者hiPSCs进行了区分.
- 通过调整差异化参数,共同培养,流量和HDAC抑制剂来尝试成熟.
- 研究了替代的分化协议和ETV2转染.
- 分析包括流细胞计,共聚焦显微镜和ELISA用于内皮标记物和VWF.
主要成果:
- 标准的hiPSC-EC分化产生了具有典型内皮细胞标志物但低VWF的细胞.
- 共同培养,流动,HDAC抑制剂和ETV2传染表明VWF生产和WPB结构的改善有限.
- 替代方案对hiPSC-EC成熟度的影响最小.
结论:
- 在长时间培养 (>30天) 后,hiPSC-ECs可以获得更成熟的表型,具有延长的WPBs.
- 扩展培养受限于细胞数量低和随着时间的推移而恶化.
