使用小型金属结合蛋白SmbP的抗菌Scygonadin的高产量的表达和净化
Jessica J Gomez-Lugo1, Nestor G Casillas-Vega2, Alma Gomez-Loredo1,3
1Facultad de Ciencias Quimicas, Universidad Autonoma de Nuevo Leon, Avenida Universidad s/n, Ciudad Universitaria, San Nicolas de los Garza 66455, Mexico.
Microorganisms
|February 24, 2024
概括
在细菌中产生抗微生物很困难. 这项研究表明,一种小型融合蛋白,SmbP,有效地表达和净化大肠杆菌中的抗微生物斯基戈纳丁,产生潜在疗法的活性化合物.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 在像大肠杆菌这样的细菌菌株中产生具有二硫化键的活性抗微生物具有挑战性,因为减少了细胞质环境,潜在的包容体形成和蛋白质分解性降解.
- 使用大肠杆菌中较大的融合蛋白的传统方法可以限制重组的最终产量.
- 一个小的,可以通过亲和力净化的融合伙伴是有效的抗微生物生产的理想选择.
研究的目的:
- 调查小型金属结合蛋白SmbP作为聚变合作伙伴的实用性,以表达和净化E. coli中的抗菌性螺旋.
- 为了评估合到SmbP的scygonadin结构的产量和纯度.
- 为了评估净化赛戈纳丁构成的抗菌活性.
主要方法:
- 设计了两个scygonadin结构 (单体和串联重复) 用一个N端的SmbP标签.
- 构造物被表达为大肠杆菌SHuffle T7菌株.
- 通过固定金属亲和色谱 (IMAC) 进行净化,随后对黄金葡萄球菌进行抗菌活性测试.
主要成果:
- SmbP被证明是一个有效的融合伙伴,产生约20 mg/mL的单体和30 mg/mL的双重重复的scygonadin在95%的纯度.
- 这两种scygonadin构造均表现出对S. aureus的抗菌活性,最小抑制度 (MIC) 分别为4μM和40μM.
结论:
- 小金属结合蛋白SmbP显示出作为融合合作伙伴的显著潜力,用于生产大肠杆菌中的活性抗菌,用于治疗应用.
- 赛戈纳丁构造物显示出对S. aureus有前途的抗菌活性,表明它们作为新抗菌药物开发候选者的潜力.
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