XPORT ENTRAP:一个液滴微流体平台,用于增强微生物物种之间的DNA转移
Jose A Wippold1, Monica Chu1, Rebecca Renberg1
1United States Combat Capabilities Development Command Army Research Laboratory - DEVCOM ARL, Adelphi, MD, USA.
New biotechnology
|February 26, 2024
概括
合成生物学需要有效地将DNA转移到微生物中. 一个新的DNA ENTRAP (DNA ENhanced TRAnsfer Platform) 系统使用微流体来改善DNA转移到难以工程化的细菌中.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 合成生物学 合成生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 有效地将DNA引入微生物对于合成生物学应用至关重要.
- 目前的电穿孔等方法仅限于少数微生物物种,阻碍了新型底盘的使用.
- 由于有限的DNA转移技术,许多微生物的基因工程仍然具有挑战性.
研究的目的:
- 为了提高DNA转移效率,使用滴滴微流体平台将DNA转移到反抗性微生物中.
- 为适应微流体应用的广泛宿主结合菌株 * Bacillus subtilis * XPORT.
- 开发一种用于高通量基因工程的自动化系统.
主要方法:
- 使用滴滴微流体平台,将细胞封装在油中的水乳液中,作为皮科升生物反应器.
- 使用 * Bacillus subtilis * XPORT 菌株进行基于结合的 DNA 转移.
- 开发了DNA ENTRAP (DNA ENhanced TRAnsfer Platform) 系统,用于在乳液滴中控制细胞与细胞的接触.
主要成果:
- 与基准方法相比,证明了XPORT介导基因转移效率的提高.
- 在使用*Bacillus subtilis*供体和受体菌株的结合中实现了增加的吞吐量.
- 展示了微流体实验室芯片系统固有的自动化测试能力.
结论:
- DNA ENTRAP显著提高了基于结合的DNA传输效率和吞吐量.
- 该平台可以简化培养和基因转移过程的自动化.
- 该系统为未来高通量微生物细胞工程和查应用铺平了道路.


