对光标记技术进行比较分析,以追踪犬胎干细胞
Andressa Valim Parca1, Naira Caroline Godoy Pieri1, Paulo Fantinato Neto1
1Department of Veterinary Medicine, Faculty of Animal Sciences and Food Engineering, University of São Paulo, Pirassununga, Brazil.
Tissue engineering. Part C, Methods
|February 27, 2024
概括
这项研究比较了光标记方法,用于犬子胚胎介质干细胞 (AmMSCs). 商业光剂提供了更快的检测,而GFP提供了更长的持久性跟踪AMMSCs在再生医学.
科学领域:
- 再生医学是一种再生医学.
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 兽医科学 兽医科学 兽医科学
背景情况:
- 胚胎介质干细胞 (AmMSCs) 是再生医学有前途的,因为它们的可访问性和低免疫性.
- 追踪AMMSC对于验证它们在治疗应用中的有效性至关重要.
- 为了大规模使用AmMSCs,需要有效和可靠的光标签.
研究的目的:
- 评估和比较不同的光标签方法,用于犬类AmMSCs.
- 为了确定最适合的追踪剂来追踪AmMSCs在家用动物研究.
- 评估犬类AmMSC中的光阳性,强度和寿命.
主要方法:
- 狗的AMMSC被标记使用两个商业光体 (CellTrace CFSE和CellTracker Green CMFDA) 和绿色光蛋白 (GFP) 表达的lentiviral转导.
- 光检测,强度和细胞阳性被用流式细胞计对时间进行了分析.
- 每种方法的标签持久性和处理特性都被评估.
主要成果:
- 所有的标签方法都产生了可检测的光.
- 商业光剂 (CTrace,CTracker) 显示早期检测 (6小时) 和高阳性率 (第7天高于70%),但在第20天显著下降.
- GFP表达延迟检测 (≥48小时),但提供了更长的光持久性,尽管在重复之间观察到的变化.
结论:
- 商业光剂提供快速和一致的标签,用于短期追踪犬类AmMSCs.
- GFP表达提供了长时间的细胞跟踪,但需要优化以保持一致性.
- 这些发现支持在再生医学中进行犬类AMMSC研究的非基因组标记策略.
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