在大鼠胚胎和产后大脑中基因验证的参考基因验证 超homocysteinemia模型
Anna A Kovalenko1, Alexander P Schwarz1, Anastasiia D Shcherbitskaia1,2
1I.M. Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia.
Neurotoxicity research
|February 29, 2024
概括
孕产妇的高血糖血 (HCY) 损害了胎儿的大脑发育. 这项研究确定了最稳定的家政基因,用于对受HCY影响的后代大脑进行准确的基因表达分析.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 发展生物学 发展生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 孕产妇高血糖血症 (HCY) 与胚胎大脑发育受损和长期神经后果有关.
- 在HCY模型中进行准确的基因表达研究需要稳定的家政基因才能正常化.
- 之前的研究缺乏对受HCY影响的后代大脑在不同发育阶段的家政基因稳定性的全面分析.
研究的目的:
- 评估常用的家政基因在暴露于母体HCY的老鼠后代大脑中的表达稳定性.
- 在这个特定的发育神经毒性模型中确定最可靠的基因参考基因,用于准确的基因表达分析.
主要方法:
- 怀孕的Wistar大鼠被给予L-氨酸以诱导HCY,从而影响胎儿血液和大脑的同类半氨酸水平.
- 用RT-qPCR在整个胚胎大脑和特定大脑区域的胚胎第14天 (E14),第20天 (E20),出生后第20天 (P20) 和第90天 (P90) 评估了家庭基因表达.
- 使用RefFinder在线工具分析了基因表达稳定性.
主要成果:
- 大多数测试的家政基因在E14和E20时在胎儿大脑中表现出稳定的mRNA表达.
- 根据发育阶段的最佳家政基因有所不同:Actb,Ppia,Rpl13a在E14;Ywhaz,Pgk1,Hprt1在E20和P20;Hprt1,Actb,Pgk1在P90.
- Gapdh 显示出有限的稳定性,只在海马体,不建议作为HCY模型的通用参考基因.
- Hprt1和Pgk1在多个大脑区域和发育时间点 (E20,P20,P90) 中表现出最高的整体稳定性.
结论:
- 选择合适的家政基因对于在孕产妇高血糖血症模型中可靠的基因表达研究至关重要.
- 建议使用Hprt1和Pgk1作为最稳定的基因参考基因,用于从胚胎到成年阶段分析HCY受影响大鼠大脑中的基因表达.
- Actb,Ppia和Rpl13a适用于14日胚胎阶段的正常化.
