辅助剂提取和缓冲区交换对重组单克隆抗体稳定性的影响

科学领域:

• 生物制药开发 生物制药开发
• 蛋白质化学 蛋白质化学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 生物类似的监管申请要求证明与原始产品的分析和功能相似性.
• 药物配方中的助剂可以干扰生物治疗蛋白质的表征.
• 缓冲区交换通常用于分离蛋白质进行分析,但其对稳定性的影响尚未完全理解.

研究的目的:

• 研究基于超过-透过的缓冲区交换对单克隆抗体 (mAb) 稳定性的影响.
• 确定mAb隔离如何影响更高阶结构和变体形成.
• 为生物类似药制造商提供关于辅助剂对蛋白质稳定性的影响的建议.

主要方法:

• 超过-透过用于mAb隔离.
• 光谱法用于评估更高阶结构变化.
• 离子交换色谱用于量化基本变异的形成.

主要成果:

• 重复的缓冲区交换周期导致了mAb高阶结构的显著变化,以光最大值的5.0nm红移表示.
• 隔离在创新者和生物相似样本中增加了基本变异的形成 (例如,Tmab的19.1%至26.7%和32.3%至36.9%).
• 根据配方成分,在特定条件下可以恢复mAb的稳定性.

结论:

• 通过缓冲区交换的mAb隔离显然会影响蛋白质的稳定性,影响更高阶结构和变异形状.
• 在生物相似性评估过程中,生物相似制造商必须考虑这些辅助剂诱导的稳定性变化.
• 对稳定mAbs隔离后的配方策略进行进一步的研究是有必要的.