通过同位素稀释质谱法量化SARS-CoV-2单克隆IgG质量分数的量化
G Martos1, M Bedu2, R D Josephs2
1Bureau International Des Poids Et Mesures (BIPM), Sèvres, France. Gustavo.martos@bipm.org.
Analytical and bioanalytical chemistry
|March 1, 2024
概括
标准化SARS-CoV-2抗体测试需要准确测量单克隆抗体 (mAb) 材料. 这项研究详细介绍了同位素稀释质谱方法来量化SARS-CoV-2 IgG mAb,达到390 mg/g的质量分数.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 随着COVID-19的流行,人们越来越需要可靠的SARS-CoV-2血清学测试.
- 这些测试的标准化对于监测疾病进展和免疫反应至关重要.
- 有特征的单克隆抗体 (mAb) 材料对于测试标准化至关重要.
研究的目的:
- 描述一种SARS-CoV-2单克隆抗体 (mAb) 材料的质量分数的值分配方法.
- 为标准化SARS-CoV-2抗体测定建立参考材料.
- 报告国际实验室间比较研究 (CCQM-P216) 的结果.
主要方法:
- 用液态染色体-同位素稀释质谱法 (LC-ID-MS) 对SARS-CoV-2 Spike glycoprotein进行人性化的IgG mAb的值赋值.
- 通过LC-ID-MS作为替代分析物的氨基酸和蛋白型的量化.
- 使用大小排除色谱与紫外线检测 (SEC-UV) 确定单体质量分数.
- 高分辨率质谱 (hrMS) 用于分子重量评估和杂质检测.
主要成果:
- 在溶液中的单体SARS-CoV-2IgG的质量分数被确定为390±16mg/g.
- 方法的真实性通过氨基酸分析的同类IgG1材料来验证.
- LC-ID-MS和SEC-UV为准确的值赋值提供了补充数据.
结论:
- 开发的LC-ID-MS和SEC-UV方法适用于赋值mAb材料.
- 这种特征的mAb材料可以作为标准化SARS-CoV-2血清学试验的关键参考.
- 准确量化mAbs对于确保诊断和研究工具的可靠性至关重要.
