在阿尔茨海默氏病中使用高通量UPLC-ESI技术的CSF N-Glycomics

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 神经科学是一个神经科学.

背景情况:

• 糖体,或完整的糖体,在生物过程中起着至关重要的作用.
• 脑脊液 (CSF) N-甘氨酸的结构阐明对于理解神经疾病至关重要.
• 现有的N-甘氨酸分析方法可能耗时且缺乏吞吐量.

研究的目的:

• 提出一种高通量方法,用于CSF N-glycome 的结构阐明.
• 调整和优化一个商业套件 (RapiFluor-MS) 用于CSF N-glycan分析.
• 为了实现快速,准确和异构分辨分析的CSFN-glycans.

主要方法:

• 使用商用WATERSTM RapiFluor-MS (RFMS) 套件进行N-deglycosylation和标记.
• 修改了RFMS的方法,增加了糖化酶的时间.
• 采用高分辨率的质量分析仪进行敏感和准确的CSF N-glycan分析.

主要成果:

• 实现了一种高通量方法,能够同时分析多达96个样本.
• 获得的质量准确度为5ppm以上,用于CSF N-glycan识别.
• 证明了分离和识别N-glycan异构体的能力.

结论:

• 优化的RapiFluor-MS方法为CSF N-糖结构阐明提供了快速有效的方法.
• 这种高通量方法方便对CSF进行大规模的糖性研究.
• 增强的精度和同位素分辨率提高了在神经疾病中发现生物标志物的潜力.