质谱成像和组织学用于分析发芽的肠道器官
Emily R Sekera1, Kubra B Akkaya-Colak2,3, Arbil Lopez1
1Department of Chemistry and Biochemistry, The Ohio State University, 100 W 18th Ave, Columbus, Ohio 43210, United States.
Analytical chemistry
|March 1, 2024
概括
针对3D有机体的优化样本准备使空间分析成为可能. 在HPMC和PVP中嵌入未固定的有机体,可保留多重成像质谱和组织学的形态,增强脂质信号检测.
科学领域:
- 再生医学是一种再生医学.
- 癌症生物学 癌症生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 三维 (3D) 器官在再生医学和癌症生物学中至关重要.
- 有机体的脆弱性和芽结构挑战空间分析和标准制备方法.
- 现有的技术可能会破坏有机体形态,阻碍详细的研究.
研究的目的:
- 优化样品准备方法,用于3D有机体的空间分析.
- 开发与质谱成像 (MSI) 和免疫组织学技术兼容的协议.
- 为了能够同时评估有机体的形态,细胞增殖和分子分布.
主要方法:
- 用各种溶液嵌入小鼠肠道器官:凝,CMC-凝-CMC-糖和HPMC/PVP.
- 对有机体进行了分析,包括和没有化固定.
- 脂质分布被MSI评估,加上连续部分的H&E染色和免疫光 (IF).
主要成果:
- 化学固定改善了组织学,但抑制了MALDI脂质信号.
- 不固定的有机体样本增强了MALDI的脂质信号.
- 在HPMC/PVP中嵌入未固定的有机体为MSI和组织学提供了最佳的结合结果,允许Ki67扩散评估和PE的识别.
结论:
- HPMC/PVP嵌入方法在保存有机体形态方面优越,同时增强MSI脂质信号检测.
- 这种优化的协议可促进多重成像质谱分析以及组织学评估.
- 这些发现有助于我们更好地理解复杂的有机结构中不同细胞子集中的生物过程.
