为了增加Und-P的可用性而对大肠杆菌进行工程设计,这导致了糖表达技术的重大改进
Emily J Kay1, Manoj K Dooda2, Joseph C Bryant3
1Department of Infection Biology, London School of Hygiene and Tropical Medicine, London, WC1E 7HT, UK.
Microbial cell factories
|March 1, 2024
概括
工程化大肠杆菌可以保持更高的无二烯酸 (Und-P) 水平,显著提高细菌糖甘的表达,用于疫苗和治疗等应用.
科学领域:
- 细菌葡萄糖生物学 细菌葡萄糖生物学
- 代谢工程是代谢工程.
- 合成生物学 合成生物学
背景情况:
- 细菌表面甘氨酸被合成使用无二烯酸 (Und-P) 作为脂质载体.
- Und-P的可用性通常受到合成速度和酶之间的竞争的限制.
研究的目的:
- 研究增加的Und-P可用性对细菌糖甘合成的影响.
- 为了改造大肠杆菌以提高Und-P水平和甘氨酸生产.
主要方法:
- 在大肠杆菌中删除非必要的糖酶转移酶/糖酶转移酶 (PGTs/GTs),以减少 Und-P 竞争.
- 过度表达了Und-P(P) 合成酶 (uppS) 以增加Und-P合成速率.
- 量化的Und-P水平和测量的糖表达.
主要成果:
- 与野生类型相比,工程大肠杆菌 (ΔPGT/GT/puppS) 保持了3倍高的Und-P水平.
- 增加的Und-P可用性导致了内源性和重组性甘氨酸表达的增强.
- 在工程细胞中实现了Streptococcus pneumoniae血清型4囊的7倍表达.
结论:
- 大肠杆菌可以被设计为维持高的Und-P水平.
- 可以操纵Und-P路径以增加Und-P依赖聚合物的生产.
- 提高Und-P的可用性对于优化生物技术应用的细菌甘氨酸表达系统至关重要.
