样品预处理和基于尺寸的提取方法对细胞外囊的物理和分子配置的影响
Lucile Alexandre1,2,3, Molly L Shen1,2, Lorenna Oliveira Fernandes de Araujo1,2
1Biomedical Engineering Department, McGill University, Montreal, Quebec H3A 2B4, Canada.
ACS sensors
|March 4, 2024
概括
通过比较细胞外囊泡 (EV) 提取方法,可以发现超离心法提供了高产量,而尺寸排除色谱技术则具有成本效益. 预分析参数对临床应用的EV分析有重大影响.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 是关键的细胞间通信器.
- EV分析对诊断和监测健康和疾病充满希望.
- 标准化的EV隔离和保存方法对于可靠的结果至关重要.
研究的目的:
- 为了比较不同等离子体保存剂的疗效.
- 为了对四种不同的EV提取方法进行比较:超离心法 (UC),尺寸排除色谱法 (SEC),离心过法 (LoDF) 和 accousto-sorting (AcS).
- 根据EV完整性,大小,度,纯度,蛋白质配置文件,吞吐量,时间和成本来评估提取方法.
主要方法:
- 他们比较了等离子体保存剂.
- 四种EV提取技术 (UC,SEC,LoDF,AcS) 应用于血和细胞超.
- 电动汽车的特点是完整性,尺寸分布,度,纯度和9个蛋白质标记.
- 每种方法的吞吐量,结果的时间和成本都被评估.
主要成果:
- 抗凝剂的选择 (EDTA与酸盐) 影响EV提取不同,取决于方法.
- UC产生了低污染的高纯度电动汽车.
- SEC是快速和廉价的,但产生了较低纯度的电动汽车.
- LoDF和AcS是可自动化的,需要小量的,并提供快速处理.
- 洛德 (LoDF) 面临着与等离子体的堵塞/污染问题;阿克斯 (AcS) 的纯度高,但产量较低.
- 蛋白质配置文件表明,不同的方法可以隔离不同的EV亚群.
结论:
- 没有单一的EV提取方法是普遍优越的;每个都有独特的优点和弱点.
- 预分析因素,包括收集和预处理,显著影响EV特征,必须标准化.
- 了解方法特定偏差对于解释EV数据和推进其临床实用性至关重要.
