开发多重反转录定量PCR (qPCR) 方法,用于检测中国猪病毒性腹的常见致病原体
Wenbo Song1,2,3, Yixue Feng4, Jiali Zhang4
1National Key Laboratory of Agricultural Microbiology, College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, 430070, Wuhan, China.
Porcine health management
|March 5, 2024
概括
一种新的TaqMan多重qPCR方法可以同时检测四种关键的猪腹病毒:猪流行性腹病毒 (PEDV),传染性胃肠炎病毒 (TGEV),猪三角冠状病毒 (PDCoV) 和轮状病毒A (RVA). 该工具有助于对猪病毒性腹的差异诊断和监测.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 动物卫生 动物健康
背景情况:
- 病毒性腹疾病在全球猪业中造成显著的发病率,死亡率和经济损失.
- 猪流行性腹病毒 (PEDV),传染性胃肠炎病毒 (TGEV),猪三角形冠状病毒 (PDCoV) 和A组猪轮状病毒 (RVA) 是中国猪病毒性腹的主要致病原体,经常同时感染群体.
- 目前的诊断方法缺乏方便的同时检测这四个普遍的病毒病原体.
研究的目的:
- 开发和验证一种方便的多重诊断方法,用于同时检测PEDV,TGEV,PDCoV和RVA.
- 评估中国猪群中这四种病毒的流行率和共感染模式.
主要方法:
- 开发一个TaqMan多重复合量的聚合酶连锁反应 (qPCR) 试验.
- 应用开发的qPCR方法,在2022年分析来自2075家中国农场的7342个猪便/直肠拭子样本和1246个猪肠样本.
主要成果:
- 多重qPCR显示出高灵敏度,目标病毒的最低检测极限为3-8副本/μL.
- 证实了优异的特异性,没有与其他常见的猪病毒观察到交叉反应.
- 发现PEDV (22.21%) 和RVA (44.00%) 的高阳性率,在17.35%的农场中发现PEDV和RVA的同时感染.
结论:
- 一种敏感和特定的TaqMan复合qPCR方法用于同时检测PEDV,TGEV,PDCoV和RVA已经成功开发出来.
- 这种方法为中国猪病毒性腹的监测和差异诊断提供了方便的工具.
- 这些发现强调了PEDV和RVA的严重流行以及它们在中国猪群中共同感染的常见情况.
