使用SELEX方法检测埃普西隆毒素的DNA纳米结构Aptamer的查和识别
Nafiseh Shafiei1, Hamideh Mahmoodzadeh Hosseini2, Jafar Amani2
1Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran.
Iranian journal of pharmaceutical research : IJPR
|March 6, 2024
概括
研究人员开发了DNA吸附剂来检测西龙毒素 (ETX),这是来自Clostridium perfringens的强有力的毒素. 两种aptamer,ETX3和ETX11,对ETX检测具有很高的亲和力和特异性,使得快速诊断测试成为可能.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 来自Clostridium perfringens的埃普西隆毒素 (ETX) 是一种非常强大的毒素,负责肠炎.
- 由于ETX的毒性,快速和简单的检测方法至关重要.
- DNA 体是单链寡核化物,具有高特异性和对目标分子的亲和力,类似于单克隆抗体.
研究的目的:
- 为了分离和表征高亲和度单链DNA (ssDNA) 适合西龙毒素 (ETX) 的特异性阿巴马.
主要方法:
- 通过指数式丰富对联体的系统进化 (SELEX) 被用来识别潜在的体.
- 与酶相关的apt-absorbent测定 (ELASA) 和表面等离子体共振 (SPR) 用于评估aptamer亲和力和ETX的特异性.
主要成果:
- 两个阿普坦体,ETX克隆3 (ETX3) 和ETX11,对ETX表现出有利的特异性.
- 对于ETX3和ETX11的分离常数 (Kd) 分别为8.4 ± 2.4E-9M和6.3 ± 1.3E-9M.
- ETX3和ETX11的检测极限分别为0.21μg/mL和0.08μg/mL.
结论:
- 鉴定到的体 (ETX3和ETX11) 对毒素有很高的亲和力和特异性.
- 这些体适合开发用于ETX检测的基于体的快速诊断测试.
