牛乳类巨细胞的可复制隔离,用于分析宿主病原体相互作用

科学领域:

• 兽医免疫学 兽医免疫学
• 牛乳腺炎研究 牛乳腺炎研究
• 细胞免疫学 细胞免疫学

背景情况:

• 牛奶中的巨细胞对于乳内感染防御至关重要.
• 现有的分离乳腺巨细胞的方法复杂,不一致,并可能损害细胞.
• 杆菌 (Streptococcus uberis) 是牛乳炎的主要原因,具有独特的发病因子.

研究的目的:

• 开发一种可靠,可复制和具有成本效益的方法,用于从原奶中分离牛乳母细胞巨细胞.
• 为了使这些巨细胞的ex-vivo培养,细菌挑战和响应测量.
• 建立一个强大的模型来研究乳腺中的病原体与宿主相互作用.

主要方法:

• 使用稀释牛奶的低速离心,然后粘附于组织培养处理的塑料.
• 从全脂牛奶中有效地分离了巨细胞,体细胞数量有所变化.
• 建立了一个细菌挑战和测量细胞因子生产 (IL-1β) 的协议.

主要成果:

• 每升牛奶的平均产量为1.27 × 10^7个细胞.
• 孤立的巨细胞仍然对Streptococcus uberis的挑战有反应,IL-1β的产量在20小时达到峰值.
• 确定了最佳的感染多重性 (50:1细菌:巨) 和针对LPS的标准化IL-1β生产.

结论:

• 建立了一种具有成本效益的非侵入性方法,用于从原奶中分离牛乳母细胞巨细胞.
• 该方法提供了一种可复制的活体模型,用于研究巨菌-病原体相互作用,特别是与Streptococcus uberis.
• 细胞因子反应测量的标准化允许在实验之间进行可靠的比较.