可光激活的桑 (PaX) 染料可以实现定量,双色和活细胞MINFLUX纳米镜

科学领域:

• 超高分辨率显微镜的使用方法
• 生物物理学的生物物理.
• 化学生物学是化学生物学.

背景情况:

• 对于高分辨率成像,MINFLUX纳米镜需要特定的光体特性.
• 可光切换的染料对MINFLUX至关重要,它可以暂时控制光.
• 在MINFLUX中用于561nm激发的现有光体具有局限性.

研究的目的:

• 评估用于MINFLUX纳米显微镜的新型光活性色素 (PaX) 染料.
• 为了比较PaX染料与现有的光体 (如mMaple) 的性能.
• 为先进的MINFLUX应用引入新的PAX染料,包括双色和活细胞成像.

主要方法:

• 对PaX染料和mMaple的MINFLUX局部化成功率的定量比较.
• 对内源标记核孔复合体的有效标签效率的分析.
• 开发和应用PaX₅₉₅用于双色成像和评估PaX光激活特征.

主要成果:

• 与MINFLUX中的mMaple相比,PaX染料显示出更高的局部化效率.
• PaX染料的性能与单分子局部化显微镜中的已知可逆分子开关相似.
• PaX染料可实现强大的双色561nmMINFLUX成像和快速活细胞成像.

结论:

• PaX染料是561nmMINFLUX纳米显微镜的高效光剂.
• 这些染料满足了精确标签定位和定量分析的要求.
• PaX染料显著提升了MINFLUX成像的能力,特别是在活细胞应用中.