在大肠杆菌中细菌膜囊泡的蛋白质组 - - 在两个不同的介质中进行的时间过程比较研究
Mia S C Yu1, Dapi Menglin Chiang1,2,3, Marlene Reithmair2
1Division of Animal Physiology and Immunology, School of Life Sciences Weihenstephan, Technical University of Munich (TUM), Freising, Germany.
Frontiers in microbiology
|March 21, 2024
概括
来自大肠杆菌的细菌膜囊泡 (bMVs) 的数量和蛋白质含量因培养基和时间而异. 这些bMVs,无论条件如何,都会在人体细胞中引发显著的促炎细胞因子反应.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 细菌,像真核细胞一样,释放膜囊泡 (MVs).
- 细菌MVs (bMVs) 越来越多地被认为是它们在宿主微生物群相互作用中的作用.
- 在不同的条件下,bMVs的组成和功能在很大程度上仍未被探索.
研究的目的:
- 研究培养基和生长阶段对大肠杆菌bMV组成和功能的影响.
- 使用先进的成像和蛋白质组技术来描述bMVs.
- 评估大肠杆菌bMVs的促炎潜力.
主要方法:
- 从 Lysogeny (LB) 和 RPMI 1640 介质中分离 E. coli bMVs 在不同的生长阶段 (滞后,日志,静止).
- 通过纳米粒子跟踪分析 (NTA),冷电子显微镜 (Cryo-EM),传输电子显微镜 (TEM) 和液态染色体质谱法 (LC-MS/MS) 进行分析.
- 通过对人类单细胞THP-1细胞进行治疗和测量IL-1β和IL-8细胞因子表达的功能评估.
主要成果:
- bMV颗粒数量随着培养时间的增加而增加.
- 化EM和TEM证实了所有条件的完整的bMV形态.
- 蛋白质组学确定了140种蛋白质,包括常见标记物 (OmpA,GroEL) 和特定条件的蛋白质.
- bMV对THP-1细胞的治疗诱导了显著的IL-1β和IL-8表达.
结论:
- 培养基和持续时间显著影响大肠杆菌bMV产量和蛋白质组状况.
- 在所有测试条件下一致识别大肠杆菌核心蛋白质 (OmpA,GroEL).
- 孤立的bMVs保留了功能,在人类细胞中诱导了可比的细胞因子反应.
