修改了体外AATCC-100程序,用于测量伤口带中的可活细菌
Sang Hyuk Lee1,2,3, Thomas Glover1,2,3, Nathan Lavey2,3
1Department of Chemical and Biomolecular Engineering, Whiting School of Engineering, Johns Hopkins University, Baltimore, MD, United States of America.
PloS one
|March 21, 2024
概括
这项研究揭示了定量实时PCR (qRT-PCR) 提供了一种比传统培养方法更精确的方法来评估抗微生物伤口包裹. 它准确地测量了对抗 Pseudomonas aeruginosa 和 Staphylococcus aureus 等细菌的敷料的依赖时间的有效性.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 微生物学 微生物学
- 材料科学 材料科学 材料科学
背景情况:
- 慢性伤口造成了严重的医疗负担,在美国每年高达500亿美元的医疗费用.
- 不适当的伤口护理可能导致严重的并发症,包括机会性感染,截肢和死亡率增加.
- 目前用于评估抗微生物伤口包裹的标准方法,如AATCC-100,可能会通过忽略活力但不可培养 (VBNC) 细菌来高估有效性.
研究的目的:
- 使用定量实时聚合酶链反应 (qRT-PCR) 评估AATCC-100协议的准确性.
- 测量伤口包裹的依赖时间的抗菌疗效.
- 为了比较qRT-PCR与传统的涂层方法来检测有生命力但不能培养的细菌.
主要方法:
- 使用和不使用银离子的商业伤口包裹被测试对抗Pseudomonas aeruginosa和金黄色葡萄球菌.
- 使用传统的AATCC-100方法和qRT-PCR分析样本,测量特定的细菌基因 (proC和16srRNA).
- 计算了日志缩减以比较每个方法确定的依赖时间的抗微生物特性.
主要成果:
- 随着时间的推移,测试剂的抗微生物特性逐渐减弱,这是qRT-PCR和涂层方法所表明的.
- 与培养方法相比,qRT-PCR结果显示标准偏差较低,表明精度更高.
- 第1天PCR日志减少为4.31 ± 0.54,到第3天降至1.22 ± 0.97,而涂层显示从6.31 ± 3.04减少到5.89 ± 2.41.
结论:
- qRT-PCR提供了一种更精确,更可靠的方法来评估伤口带的抗菌疗效.
- 这项研究强调了传统方法可能忽略活跃但不能培养的细菌的潜力.
- 使用qRT-PCR和培养方法进行并行分析,可以更全面地描述伤口包裹的抗菌活性.
