在生物样本中分析维生素D及其代谢物 - - 第一部分:优化和比较UHPSFC-MS/MS和UHPLC-MS/MS方法

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 生物化学 生物化学
• 代谢学 代谢学 代谢学

背景情况:

• 脂溶性维生素D对人类健康至关重要,缺乏维生素D与骨疾病,癌症,代谢和免疫系统疾病有关.
• 目前的维生素D分析方法往往忽略了低度的氧化和化代谢物,包括异构体和表构体.
• 对各种维生素D代谢物的全面分析对于准确的健康评估至关重要.

研究的目的:

• 开发一种快速和选择性的超高性能超临界流体染色学 (UHPSFC) 方法,用于分析各种维生素D代谢物.
• 将UHPSFC与超高性能液态染色学 (UHPLC) 进行比较,用于分离维生素D及其各种代谢物.
• 建立一种敏感的方法来量化维生素D代谢物,包括化和化形式和异构体.

主要方法:

• 开发一种UHPSFC方法,使用1-氨基 (1-AA) 列和CO2/甲醇/异醇/水移动相.
• 优化柱体温度和逆压,以有效分离维生素D2,D3,四种D3和八种氧化代谢物.
• 对大气压化学电离 (APCI) 和大气压光电离 (APPI) 源与双重质谱学 (MS/MS) 的比较;UHPLC-MS/MS也得到了评估.

主要成果:

• 在10分钟内,UHPSFC成功地分离了维生素D2,D3,四种维生素D3和八种氧化代谢物,包括异构体.
• 虽然UHPLC-MS/MS能够更好地分离化形式,但未能分离二化维生素D3异构体.
• UHPSFC-APCI-MS/MS表现出最低的量化极限 (1.2 - 4.9 ng/mL) 和对各种维生素D代谢物的优越选择性.

结论:

• 开发的UHPSFC-APCI-MS/MS方法是对维生素D代谢物的快速,选择性和敏感分析的一个有希望的方法.
• 这种方法可以进行全面的分析,包括化,化和异构形式,这对于生物样本分析至关重要.
• 在复杂的维生素D代谢物分离和定量方面,UHPSFC比UHPLC具有显著的优势.