从剃须Sinonovacula constricta获得的Toll-like受体2的识别和功能分析
Beibei Wang1, Yina Shao1, Xuelei Wang2
1State Key Laboratory for Managing Biotic and Chemical Threats to the Quality and Safety of Agro-products, Ningbo University, Ningbo 315211, China.
International journal of biological macromolecules
|March 22, 2024
概括
剃须刀中的托尔类受体2 (TLR2) 作为一个关键的模式识别受体. 它的沉默会影响免疫反应和对抗Vibrio parahaemolyticus的生存.
科学领域:
- 无脊椎动物免疫学 无脊椎动物免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 这是天生的免疫力.
背景情况:
- 收费类受体 (TLRs) 是天生的免疫系统的关键组成部分,识别病原体相关的分子模式 (PAMPs).
- 剃刀 (Sinonovacula constricta) 是一种商业上重要的双动物,易受细菌感染,需要对它们的免疫机制进行研究.
研究的目的:
- 克隆和表征来自Sinonovacula constricta (ScTLR2) 的托尔类受体2 (TLR2) 同类物.
- 调查ScTLR2在应对细菌挑战时的免疫功能及其在先天免疫路径中的作用.
主要方法:
- 克隆全长的ScTLR2cDNA并分析其推导的氨基酸序列.
- 定量实时PCR (qRT-PCR) 检查不同组织中的ScTLR2mRNA表达和细菌挑战后.
- 用各种PAMP进行重组蛋白表达和结合试验.
- 细菌结合试验. 细菌结合试验.
- 通过RNA干扰 (siRNA) 来使ScTLR2沉默,随后对免疫基因表达和生存率进行分析.
主要成果:
- 成功克隆了ScTLR2基因,编码了具有保存TLR2结构域的蛋白质.
- 在Vibrio parahaemolyticus感染后,ScTLR2mRNA被广泛分布,在中表达高,并且显著上调.
- 再组合的ScTLR2蛋白证明与LPS,PGN和MAN结合,并以依赖的方式结合结合的测试细菌.
- 沉默ScTLR2导致关键免疫基因 (Myd88,NF-κB,Tollip,IRF1,IRF8) 的表达减少,并在细菌挑战后降低了存活率.
结论:
- ScTLR2作为剃须刀的模式识别受体,在识别细菌病原体方面发挥着至关重要的作用.
- ScTLR2对于激活下游免疫信号通路和维持宿主对抗细菌感染的生存至关重要.
