一个简单而快速的隔离小鼠骨髓的协议,适合分化树突细胞
Runqiu Song1, Mariam Bafit1, Kirsteen M Tullett1
1Department of Biochemistry and Molecular Biology and Immunity Program, Biomedicine Discovery Institute, Monash University, Clayton, VIC 3800, Australia.
Methods and protocols
|March 25, 2024
概括
使用离心分离的加速骨髓分离方法产生了更多的树突细胞,包括1型常规树突细胞 (cDC1),用于免疫研究. 这种优化的协议提高了实验效率和细胞输出.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 来自骨髓的树突细胞生成对于研究抗原呈现和T细胞激活至关重要.
- 传统的骨髓隔离是劳动密集型的,特别是对于大规模的前体细胞需求.
研究的目的:
- 评估一种基于离心的加速骨髓分离技术,用于区分类似FMS的氨酸激酶3连接体驱动的树突细胞.
- 提高实验效率,提高1型常规树突细胞 (cDC1) 的产量.
主要方法:
- 离心法与传统冲洗方法对骨髓隔离的比较.
- 在8天内评估细胞产量,树突细胞子集比例和分化效率.
- 分析FMS类型的氨酸激酶3联体驱动的树突细胞分化.
主要成果:
- 离心法产生了类似的初始骨髓细胞数量,但在第8天细胞数量增加.
- 在不同方法之间观察到类似的树突细胞子集比例.
- 离心法导致cDC1的数量增加,cDC2和血细胞状树突细胞的输出得到改善.
结论:
- 通过离心加速骨髓分离适用于树突细胞分化.
- 这种方法提高了实验效率,并增加了cDC1s和其他树突细胞子集的产量.
- 该协议支持各种树突细胞类型的一致分化和改进的细胞计数.
关键词:
抗原呈现的呈现方式.来自骨髓的树突细胞.cDC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC1DC2DC1DC1DC2DC2DC2DC2DC3DC4DC3DC4DC4DC5cDC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2DC2传统的树突细胞.交叉表示 交叉表示动物骨髓隔离 动物骨髓隔离血细胞状的树突细胞细胞.主要细胞培养的细胞培养.
