通过种子列车方法和中间冷保存来制造无矩阵的人类多能干细胞
Kevin Ullmann1,2, Felix Manstein3,4, Wiebke Triebert3,4
1Leibniz Research Laboratories for Biotechnology and Artificial Organs (LEBAO), Department of Cardiothoracic Transplantation and Vascular Surgery (HTTG), Hannover Medical School (MHH), Carl-Neuberg-Str. 1, 30625, Hannover, Germany. Ullmann.Kevin.HTTG@mh-hannover.de.
Stem cell research & therapy
|March 26, 2024
概括
这项研究展示了一种高效的,无矩阵的方法,用于大规模的人类多能干细胞 (hPSC) 扩张,使用混合生物反应器. 这种可扩展的方法支持治疗潜力,使可靠和经济高效的hPSC生产成为可能.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
- 生物工艺工程 生物工艺工程
背景情况:
- 人类多能干细胞 (hPSC) 具有显著的治疗前景.
- 对临床应用而言,大规模,经济高效的hPSCs生产至关重要.
- 混合生物反应器 (STBR) 中的悬浮培养为hPSC扩张提供了一个可扩展的解决方案.
研究的目的:
- 为hPSCs开发一种高效,长期,无矩阵的悬浮培养方法.
- 为了优化指数 hPSC 扩散和过程可扩展性的条件.
- 为了实现符合良好制造实践 (GMP) 的hPSC的封闭系统制造.
主要方法:
- 使用STBR用于hPSC聚合物的受控,三维 (3D) 培养.
- 实施化学聚合物解离和优化通道持续时间 (3-4天).
- 使用高密度冷保存悬浮衍生hPSCs用于直接STBR接种,省略2D培养.
主要成果:
- 通过优化的3D文化实现了指数级的hPSC扩散和过程效率.
- 证明成功地省略了依赖于矩阵的二维培养步骤.
- 在8个通道 (32天) 上培养hPSC,产生大约4.7 × 10^15细胞,同时保持多能性,分化能力和型稳定性.
- 基因表达特征分析提供了关于hPSC适应3D培养的见解.
结论:
- 提出了一个灵活的,自动化友好的,完全没有矩阵的hPSC扩展战略.
- 促进了符合GMP的大规模封闭系统制造工艺的开发.
- 建立了一个强大的平台来生产治疗应用所需的大量hPSC.
关键词:
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