标准化生产hPSC衍生的心肌细胞聚合物在的旋转器瓶中
Nils Kriedemann1, Wiebke Triebert2,3, Jana Teske2
1Department of Cardiothoracic, Transplantation and Vascular Surgery (HTTG), Leibniz Research Laboratories for Biotechnology and Artificial Organs (LEBAO); REBIRTH-Research Center for Translational Regenerative Medicine; Hannover Medical School (MHH), Hannover, Germany. kriedemann.nils@mh-hannover.de.
这项研究提出了一个简单的,强大的协议,用于产生大量的人类多能干细胞衍生的心肌细胞 (hPSC-CMs) 使用旋转瓶. 该方法确保了良好制造实践 (GMP) 的遵守,促进了心力衰竭细胞治疗的临床翻译.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 心血管研究的心血管研究.
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 心力衰竭需要再生疗法来取代丢失的心肌细胞.
- 人类多能干细胞 (hPSCs) 为产生患者特异性心肌细胞 (CMs) 提供了一个有前途的来源.
- 扩大生产规模和确保良好制造实践 (GMP) 合规的挑战阻碍了hPSC衍生CMs (hPSC-CMs) 的临床应用.
研究的目的:
- 描述一种高效,强大,符合GMP的协议,用于在悬浮培养中生成hPSC-CM聚合物.
- 为了促进hPSC-CMs用于心力衰竭治疗的临床翻译.
- 为各种应用生产大量CM提供可扩展的方法.
主要方法:
- 在单层培养中扩展hPSC,以获得足够的细胞数量用于悬浮培养注射.
- 单细胞聚合物的制形成是在旋转器瓶中以300毫升的尺度进行的.
- 通过使用CHIR99021和IWP-2的WNT通路调制来诱导化学定义的心脏分化.
主要成果:
- 该协议在分化10天后产生≥100 × 10^6CMs.
- 细胞聚合物可以在培养中保持长达35天,而不会损失CM含量.
- 悬浮培养方法简单,强大,适用于具有一般hPSC处理经验的用户.
结论:
- 这种基于旋转瓶的协议使hPSC-CMs的高效,可扩展和符合GMP的生产成为可能.
- 在培养中保持CM聚合物的能力支持下游物流,并可能减少对冷保存的需求.
- 描述的策略促进了hPSC-CMs的临床转化,用于心力衰竭细胞治疗和其他需要大量CM数量的应用.
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