在体设计的玻璃化协议:一种方法来改善体外生产的牛胚胎的存活率

科学领域:

• 生殖生物学 生殖生物学
• 动物科学动物科学
• 生物物理学的生物物理.

背景情况:

• 在体外生产 (IVP) 牛胚胎的冷保存对于牛养殖计划至关重要.
• 目前的冷保存协议缺乏标准化,并且通常会导致比新鲜胚胎更低的怀孕率.
• 现有的方法并不能完全考虑基于温度和时间的胚胎对冷保护剂的透耐受性.

研究的目的:

• 开发和验证使用更短的脱水基协议,改善牛体IVP胚芽细胞的玻璃化方法.
• 优化不同温度 (25°C和38.5°C) 的平衡溶液 (ES) 暴露时间,以提高温暖后的胚胎存活率和发育率.
• 为了使 in silico 预测与 in vitro 实验数据保持一致,以改进冷保存策略.

主要方法:

• 牛胚囊 (7日和8日) 被暴露在25°C和38.5°C的标准平衡溶液 (ES) 中.
• 优化暴露时间被确定以评估它们对温暖后再扩张,化率,细胞计数和细胞亡的影响.
• 使用in silico建模来预测胚胎体积恢复,然后通过体外实验验验证.

主要成果:

• 在38.5°C的玻璃化和优化的ES曝光时间 (D7的3分40秒,D8的3分15秒) 产生了与新鲜胚胎相比的再扩张和化速度.
• 与25°C协议相比,38.5°C协议维持了D8胚囊细胞的总细胞数和降低了细胞亡率.
• 卷积恢复的in silico预测与体外观测一致,验证了优化的协议.

结论:

• 在38.5°C较短的平衡方案显著提高了牛IVP胚芽细胞的升温后再扩张和化率.
• 经过验证的方法为牛胚胎冷保存提供了一种精致,可重复的方法,有利于畜牧业.
• 这些发现也可能适用于其他哺乳动物物种胚胎的冷保存.