通过HILIC-FLD和LC-MS/MS方法对Herceptin N-Linked糖基化进行比较分析

科学领域:

• 生物制药学分析分析
• 葡萄糖生物学 葡萄糖生物学
• 分析化学是一种分析化学.

背景情况:

• 单克隆抗体,如Herceptin,是关键的治疗方法.
• 糖基化模式极大地影响抗体的生物活性和有效性.
• 了解Herceptin的N-甘氨酸概况对于质量控制至关重要.

研究的目的:

• 为了描述N-甘氨酸的形状和Herceptin中的相对丰度.
• 为了比较糖甘特征的分析方法:HILIC-FLD和LC-MS/MS.
• 为了评估欧盟 (欧盟) 和美国 (美国) 之间的糖化差异,Herceptin 批量.

主要方法:

• 用光检测 (HILIC-FLD) 进行水友交互色谱,用于释放的甘氨酸.
• 液体染色学对糖的双重质谱法 (LC-MS/MS).
• 分析了21个欧盟和14个美国的Herceptin批量.

主要成果:

• 在HILIC-FLD检测到25种甘物种;LC-MS/MS检测到26种甘形式.
• 在欧盟和美国的批量之间观察到可比的色谱谱.
• 欧盟 - 赫塞丁批量 (2022年10月到期) 显示,阿福克赛拉和高曼诺斯N-甘氨酸的增加.
• 在HILIC-FLD和LC-MS/MS之间存在显著的定量差异,但相对比例的相关性很好.

结论:

• 无论是HILIC-FLD还是LC-MS/MS都对Herceptin N-glycan分析有价值.
• 分析方法的选择影响了绝对糖甘的量化.
• 相对甘氨酸比例在各方法中都是稳定的,提供一致的质量评估见解.
• 这些发现为生物制药Herceptin制造和质量控制提供了关键数据.