对混合在细胞疗法产品中的瘤原性转化细胞进行数字软菌殖民地形成试验的协议改进和多站点验证
Kiyoko Bando1, Shinji Kusakawa2, Hideki Adachi3
1Regenerative & Cellular Medicine Office, Sumitomo Pharma Co., Ltd., Kobe, Japan; The Committee for Non-Clinical Safety Evaluation of Pluripotent Stem Cell-Derived Product, Forum for Innovative Regenerative Medicine, Tokyo, Japan.
Cytotherapy
|April 1, 2024
概括
数字软菌殖民地形成 (D-SAC) 试验检测细胞加工的治疗产品中的瘤细胞. 一个改进的协议 (协议II) 显著降低了这些关键杂质的变异性,并提高了检测灵敏度.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 监管科学是一种监管科学.
背景情况:
- 人类细胞加工治疗产品 (hCTP) 携带来自转化细胞污染物的瘤发生风险.
- 敏感和验证的测试对于检测hCTP中的这些杂质至关重要.
- 数字软菌殖民地形成 (D-SAC) 试验是用于此目的的超敏感体外方法.
研究的目的:
- 评估和优化D-SAC测定用于检测hCTPs中的瘤细胞.
- 为了减少殖民地形成效率 (CFE) 的实验室间变异性.
- 为了验证一个改进的D-SAC协议,用于敏感杂质检测.
主要方法:
- 在多个实验室使用瘤原生参考细胞的D-SAC测试协议 (I协议) 的初步评估.
- 优化D-SAC协议 (协议II) 以尽量减少CFE变化.
- 在多个地点使用被HeLa细胞添加的人类介质细胞 (hMSCs) 验证协议II.
主要成果:
- 协议I显示CFE低 (30%) 和高变性 (可复制性CV: 72%).
- 协议II使用更高度的尖细胞 (0.002%),实现了更高的CFE (63%) 和更低的变异性 (可复制性CV:18%).
- 所有参与实验室都成功地检测到了hMSC中的0.0001%的HeLa细胞,并使用了II协议,显示出高灵敏度和强度.
结论:
- D-SAC测定是一种敏感且强大的方法,用于检测hCTP中的恶性细胞杂质.
- 优化的测定条件确保高灵敏度,并控制瘤原性杂质测试的错误负率.
- 这种验证的测定对于确保HCTP的安全性至关重要.
