一种UPLC-MS/MS方法,用于同时测定人体血中阿拉基酸,酸和相关内分泌素
Xiaojing Qian1,2, Wangzhenzu Liu1, Ying Chen3
1Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai, 201203, China.
Heliyon
|April 1, 2024
概括
一种新的UPLC-MS/MS方法准确地测量了血中的内分泌大麻素 (eCB),如AEA和2-AG. 这种方法揭示了健康个体和非酒精性脂肪肝疾病 (NAFLD) 患者之间AEA,SEA,AA和SA水平的显著差异.
科学领域:
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 内分泌大麻素 (eCBs) 在调节能量,脂质和葡萄糖代谢方面发挥着至关重要的作用.
- 关键的生物活性eCB包括2 - 阿拉基多乙醇 (2-AG),阿拉基多乙醇胺 (AEA),1 - 醇醇 (1-SRG) 和醇乙醇胺 (SEA).
- 现有的分析方法缺乏在人体血中准确确定这些eCBs所需的灵敏度.
研究的目的:
- 开发和验证一种高度敏感和快速的超高性能液体染色学-并联质谱法 (UPLC-MS/MS) 方法.
- 准确测量人体血中AEA,SEA,2-AG,1-SRG,阿拉基酸 (AA) 和酸 (SA) 的含量.
- 应用验证的方法来比较健康个体和非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD) 患者的eCB资料.
主要方法:
- 样品的制备过程包括蛋白质沉和甲基三-丁乙烯液体-液体提取.
- 使用ACQUITY UPLC BEH C8柱进行了染色分离,其梯度化的是乙和水,两者都含有0.1%的酸.
- 通过多重反应监测 (MRM) 在正离子和负离子模式中检测出分析物,并使用减值的内部标准 (AA-d8,2-AG-d5,AEA-d8).
主要成果:
- 经过验证的UPLC-MS/MS方法显示出高灵敏度,定量化的下限在0.1~400 ng/mL之间,相关系数 (R2) >0.99.9.
- 获得了极好的精度 (白天:0.55-13.29%,白天:0.62%-13.90%),恢复 (77.7%-109.7%),以及矩阵效应 (90.0%-113.5%).
- 该方法的应用显示,在健康志愿者 (n=49) 和NAFLD患者 (n=62) 之间,AEA,SEA,AA和SA的血水平存在显著差异.
结论:
- 一种灵敏而强大的UPLC-MS/MS方法用于量化人体血中关键内分泌素及其前体已经成功开发和验证.
- 这种方法可以准确评估与内分泌大麻素信号传递相关的代谢概况.
- 这些发现突出了与非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD) 相关的特定内分泌大麻素水平的潜在变化.
