在线监测使用内在光技术在纳入体处理中蛋白质重新折叠的过程
Chika Linda Igwe1,2, Don Fabian Müller2, Florian Gisperg2,3
1Competence Center CHASE GmbH, Hafenstraße 47-51, Linz, 4020, Austria.
Analytical and bioanalytical chemistry
|April 4, 2024
概括
本研究引入了用于实时蛋白质重新折叠分析的内在光监测. 该技术准确地跟踪蛋白质折叠中间体和重组蛋白质生产过程中的聚合.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物工艺工程 生物工艺工程
- 蛋白质化学 蛋白质化学
背景情况:
- 包容体 (IBs) 是来自E. coli重组蛋白表达的蛋白质聚合物.
- 蛋白质重新折叠至关重要,但通常依赖于经验方法.
- 基于知识的流程开发需要可靠的监控策略.
研究的目的:
- 为了实时探索内在的托和氨酸光,实地监测蛋白质重新折叠.
- 开发一种可靠的过程分析技术 (PAT) 工具,用于蛋白质重新折叠.
主要方法:
- 使用内在光光谱学 (三聚和氨酸) 进行监测.
- 与折叠中间体和聚合物相关的光谱转移和强度变化.
- 将相关性集成到机械模型中作为观察函数.
主要成果:
- 实现了高灵敏度和可重复测量,低至0.01g/L蛋白质度.
- 证明了该技术在三种不同复杂度的蛋白质中的多功能性.
- 成功应用于评估对重新折叠效率的添加效应和工艺模式.
结论:
- 内在光提供了一种通用,可靠的PAT工具,用于实时监测蛋白质重新折叠.
- 该方法提供了关于折叠中间体和聚合范围的见解.
- 实现工业蛋白质重新折叠过程的知识驱动优化.
