一个适应的协议,从干细胞中提取微质细胞,并在研究CSF1R相关疾病中的应用
Marie-France Dorion1,2,3, Diana Casas1,3, Irina Shlaifer2,3
1Neuroimmunology Unit, Montreal Neurological Institute-Hospital, McGill University, Montreal, H3A 2B4, Canada.
Molecular neurodegeneration
|April 4, 2024
概括
我们优化了一种协议,以产生诱导的多能干细胞衍生微质细胞 (iMGL) 来自患有轴突球状和色素质细胞 (ALSP) 成人发病白脑病变的患者. 这种新方法允许研究由殖民地刺激因子1受体 (CSF1R) 变体引起的神经疾病中的微质功能障碍.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 诱导多能干细胞衍生微质细胞 (iMGL) 对研究微质细胞功能有价值.
- iMGL的分化和生存取决于殖民地刺激因子1受体 (CSF1R) 的信号传递.
- 在CSF1R相关疾病中研究微质功能障碍是由于协议限制而具有挑战性的.
研究的目的:
- 优化iMGL分化协议,用于研究具有病原性CSF1R变异的疾病.
- 从具有轴突球体和色素质细胞 (ALSP) 的成年发病性白细胞脑病变 (leukoencephalopathy) 来生成和描述IMGL,患者患有CSF1R变异.
- 为了研究CSF1R哈普洛缺陷在患者衍生的iMGL.的功能后果.
主要方法:
- 修改了现有的iMGL协议,改变了生长因子组合以实现差异化.
- 从患有特定CSF1R变异 (c.2350G>A,p.V784M) 的ALSP患者获得的iMGL.
- 通过细胞产量,标记物表达,转录组学和功能测试 (炎症,细胞化) 验证了协议的质量.
- 描述ALSP患者衍生的IMGL,将其与健康对照进行比较.
主要成果:
- 优化的协议使IMGL产量增加了三倍,并增强了与初级微质细胞的转录基因相似性.
- 来自ALSP患者的iMGL显示CSF1R信号和P2RY12表达减少,表明迁移缺陷.
- 这些IMGL表现出增加的髓细胞消化和炎症反应.
- 证实P2RY12的减少是CSF1R哈普隆缺陷的直接结果.
结论:
- 一个优化的iMGL协议为研究人类神经疾病中的微质作用提供了一个强大的工具.
- 从患有病原性CSF1R变异的ALSP患者成功生成iMGL.
- 生成的iMGL显示了与CSF1R缺乏相关的迁移,细胞和炎症的功能性改变.
