让我们开始滚动:精确控制微流体检测条件,以总结白细胞粘附级联的选择蛋白介导的滚动相互作用

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物物理学的生物物理.

背景情况:

• 白细胞粘附级联启动免疫细胞从血管到组织的招募.
• 最初的相互作用涉及sialyl-Lewis X (sLe^X) 在免疫细胞与内皮E-和P-选择素结合.
• 这种结合会减缓细胞的速度,使细胞能够进一步粘附和扩散.

研究的目的:

• 介绍微流体检测模型选择介导白细胞滚动的系统方案.
• 详细说明实验设置,执行和数据分析,用于调查免疫细胞与内皮细胞相互作用.
• 为研究初始选择性依赖性免疫细胞粘附提供一种简化方法.

主要方法:

• 使用重组选择在表面和内皮细胞单层的微流体测试的开发.
• 制造具有不同硬度的聚烯胺凝,以模仿组织微环境.
• 蛋白质结合,内皮细胞培养 (HUVEC),细胞滚动实验和ImageJ分析的协议.

主要成果:

• 一个全面的,逐步的协议进行和分析选择中介细胞滚动实验.
• 准备实验表面的方法,包括重组蛋白结合和内皮细胞单层.
• 用于量化细胞间相互作用和Fc位密度的技术.

结论:

• 该协议简化了对初始选择介导免疫细胞相互作用的调查.
• 它为在受控条件下研究白细胞粘附动态提供了一个强大的平台.
• 该方法适用于在各种生理和病理背景下理解免疫细胞贩运.