在CRISPR-Cas9中介的dsRNase淘汰中,提高了秋季军的RNAi效率

科学领域:

• 昆虫学 昆虫学是一门学科.
• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 遗传学 是一个

背景情况:

• 类昆虫对RNA干扰 (RNAi) 具有抗性,特别是在使用口服输送的双链RNA (dsRNA) 时.
• 中肠光线中的高核酶活性是这种RNAi不敏感的首要原因.
• 秋季军 (FAW),Spodoptera frugiperda,是一个重要的农业害虫,改善RNAi策略至关重要.

研究的目的:

• 为了研究中肠dSRNases在Lepidopteran昆虫的RNAi耐火性质中的作用.
• 开发一种方法,通过向dSRNase活动来提高秋季军中的RNAi效率.

主要方法:

• 在FAW中肠中,鉴定和表征了三个高度表达的dsRNase基因.
• 使用CRISPR-Cas9基因编辑创建一个同卵性突变FAW线,删除已识别的dsRNase基因.
• 评估突变型幼虫与野生类型幼虫的中肠光中的dsRNA降解水平.
• 评估向突变型和野生型FAW中抑制细胞灭亡 (IAP) 基因的RNAi的疗效.

主要成果:

• 确定了三种dsRNase基因,并发现它们在FAW中肠中表达高.
• 这三种dsRNase基因的CRISPR-Cas9调节删除导致突变幼虫的中肠膜中dsRNA降解的减少.
• 向IAP基因的RNAi导致突变FAW幼虫的目标基因敲除率显著提高,死亡率增加,与野生类型相比.
• 这些发现表明,中肠dSRNases是FAW中RNAi低效的关键贡献者.

结论:

• 中肠dSRNases在秋季军中观察到的RNAi缺陷表型中发挥着关键作用.
• 基因组编辑以去除dsRNase基因可以增强类昆虫的RNAi有效性.
• 开发可以防止酶降解的dsRNA配方可以改善FAW和其他类动物的基于RNAi的害虫控制策略.