同时对微量胺,其前体和代谢物进行质谱量测量
Krisztina de Bruyn1, Eugene F Diekman1, Claude P van der Ley1
1Department of Laboratory Medicine, University Medical Center Groningen, University of Groningen, Groningen, 9700 RB, The Netherlands.
这项研究提出了一种新的LC-MS/MS方法,用于同时量化血中的微量胺,前体和代谢物. 该方法通过防止酶降解来提高准确性,有利于神经疾病研究.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 神经科学是一个神经科学.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 微量胺是关键的神经调节剂,影响情绪,认知和荷尔蒙调节.
- 微量胺的失调与神经和精神疾病有关,如精神分裂症和帕金森病.
- 同时量化微氨酸,它们的前体和代谢物,由于度和功能组的不同,这给分析带来了挑战.
研究的目的:
- 开发一种高度敏感的液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 试验,用于同时量化人体血中的微量胺,前体和代谢物.
- 建立一个强大的分析方法,克服低分析剂度和复杂的生物矩阵所带来的挑战.
- 改善跟踪胺相关疾病的诊断和研究能力.
主要方法:
- 一种新的两步矩阵内衍生法,使用酸 (PA) 和EDC/TFEA.
- 自动在线固体相提取 (SPE) 与LC-MS/MS相结合.
- 方法根据国际指导方针进行验证,包括分析前的稳定性评估.
主要成果:
- 从一个小的血体积 (50μL) 中成功量化了八种微量胺,三种前体和四种代谢物.
- 达到低量化极限 (例如,胺和n-甲基胺的0.1nmol/L).
- 某些微量胺对酶降解的感受性已被证明,通过添加单胺氧化酶抑制剂pargyline来减轻.
结论:
- 开发了一种新的,自动化的LC-MS/MS方法与在线SPE和双衍生技术.
- 该方法提供了高的特异性,选择性,并且需要比以前的方法少得多的样本体积.
- 结合单胺氧化酶A/B抑制剂可确保通过防止分析物降解,增强临床和研究实用性的准确量化.
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