在临床评估PI3/AKT/mTOR信号活动在扩散性质瘤的预分析变量的定量评估

科学领域:

• 在瘤学瘤学.
• 分子生物学分子生物学
• 临床试验 临床试验

背景情况:

• 生物标志物驱动的临床试验需要标准化的样本采集来获得可靠的结果.
• 酸丁醇3 (PI3) - 激酶/AKT/mTOR (PI3/AKT/mTOR) 途径是扩散性质瘤的一个关键治疗点.
• 在瘤样本中测量PI3/AKT/mTOR通路活性的最佳方法尚未确立.

研究的目的:

• 研究分析前变量对在扩散性质瘤中PI3/AKT/mTOR通路活性评估的影响.
• 确定质瘤中蛋白生物标志物的最佳样本采集和储存条件.

主要方法:

• 使用小鼠质母细胞瘤模型和人类质母细胞瘤组织 (IDH野生型和IDH突变型).
• 评估了寒冷缺血时间 (CIT) 对六种关键光蛋白的影响,这些光蛋白表明PI3/AKT/mTOR活性.
• 评估了幻灯片存储条件 (温度和持续时间) 对蛋白检测的影响.

主要成果:

• 延迟的甲固定 (≥2小时) 改变或减少了大多数测量的蛋白的表达.
• 在S240/244的-核糖体蛋白S6 (p-RPS6) 显示出比其他延迟固定的标记物更大的稳定性.
• 需要在-80°C保存5个月的幻灯片,以保持化-AKT (p-AKT) 和化-真核细胞启动因子4E结合蛋白1 (p-4EBP1) 的表达;p-RPS6是不稳定的.

结论:

• 在扩散性结质瘤中,PI3/AKT/mTOR信号的准确评估受到内异质性和预分析因素的挑战.
• 时间到正规的固定和幻灯片存储条件极大地影响了脂蛋白生物标记物的完整性.
• 针对这些预分析变量的标准化协议对于临床试验中可靠的生物标志物评估至关重要.