半自动设计和可溶性表达来自Glaesserella parasuis的仿真抗原TbpAB01
Jin-Ping Chen1,2, Lin Zhou3, Jin-Song Gong1,2
1Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology, Ministry of Education, School of Life Sciences and Health Engineering, Jiangnan University, Wuxi, People's Republic of China.
Biotechnology and bioengineering
|April 10, 2024
概括
开发新型疫苗和抗生素需要可溶性细菌膜蛋白 (MP). 这项研究设计了一种仿真抗原 (ChA),以提高MP的溶解度和表达,实现治疗开发的创纪录产量.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 疫苗学 疫苗学 疫苗学
- 蛋白质工程是指蛋白质的工程.
背景情况:
- 病原性细菌膜蛋白 (MPs) 是疫苗和抗生素开发的关键目标.
- MPs的疏水性阻碍了它们在宿主细胞中的正确折叠和可溶性表达.
- 开发改善MP溶解性的策略对于治疗应用至关重要.
研究的目的:
- 开发一种全面的方法来增强细菌膜蛋白抗原的可溶性表达.
- 为了改进抗原呈现和可溶性,设计一个多表位组合抗原 (ChA).
- 选蛋白质辅助折叠元件以优化CHA的生产.
主要方法:
- 使用同源蛋白质支架和Glaesserella parasuis的转素结合蛋白A的四个表位,设计了一种多表位组合抗原 (ChA).
- 在一个工程细菌菌株中,与内源性伴侣 (groEL-ES) 共同表达了P17标记的ChA.
- 选了两种类型的蛋白质辅助折叠元件,以优化溶解度和产量.
- 使用5L生物反应器进行大规模的可溶性CHA生产.
主要成果:
- 获得0.346g/L的高度溶解的CHA产量,具有HPS阳性血清反应.
- 获得了4.27g/L的蛋白质标位,在5L生物反应器中可溶性比重超过90%.
- 报告了迄今为止可溶性MP抗原表达的最高标位.
- 证明了工程应变和共同表达系统的有效性.
结论:
- 开发的方法显著改善了细菌膜蛋白抗原的可溶性表达.
- 工程化基因抗原 (ChA) 和联合表达系统为疫苗和抗生素开发提供了一个有前途的平台.
- 这种方法为生产可溶性MP抗原提供了一个工业上可行的策略.
