一个系统的方法来识别序列框架,减少mAb的生产在一个短暂的中国子卵巢细胞表达系统中

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.
• 生物制药制造业 生物制药制造业

背景情况:

• 单克隆抗体 (mAbs) 是为了临床疗效而设计的,但在候选人选择之前,它们的"可开发性" (例如表达水平) 往往被忽视.
• 与序列变化相关的表达不良,需要昂贵的制造工艺改进.
• 难以表达的 (DTE) mAbs在折叠,组装和分泌方面表现出翻译后瓶,但发现很难泛化.

研究的目的:

• 系统地研究序列变化的影响mAb表达在工业相关条件下的规模.
• 为了确定影响中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞mAb表达的特定序列决定因素.
• 开发一个工作流程,以改善mAb候选人选择和缩短流程开发时间表.

主要方法:

• 设计了一个具有序列修改的单克隆抗体 (mAb) 变体库.
• 这些变异的评估过渡表达标位在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中.
• 分析了特定突变,残留性质 (如疏水性) 和表达水平之间的关系.

主要成果:

• 确定了91种突变,显著降低了IgG1κ抗体的短暂表达.
• 发现无法获得的残留物中的突变,特别是那些降低疏水性的人,对高抗体表达有害.
• 在初级氨基酸序列和抗体表达标位之间显示出强烈的相关性,其中变异导致高达十倍的差异.

结论:

• 序列变化显著影响mAb表达,呈现出一个关键的可开发性特征.
• 了解序列表达关系允许早期识别有问题的mAbs.
• 这种系统的方法增强了抗体候选人的选择,并简化了生物过程的开发.