来自Aspergillus oryzae的氨酸脱碳酶的鉴定和酶特性
Yui Murakami1, Soichiro Ikuta2, Wakao Fukuda2
1Department of Biosciences, Graduate School of Science and Technology, Kwansei-Gakuin University, Gakuen-Uegahara, Sanda, Hyogo, Japan.
Applied and environmental microbiology
|April 16, 2024
概括
研究人员在Aspergillus oryzae中发现了一种新型的阿氨酸脱碳酶 (ADC),名为Ao-ADC1,负责大米中的agmatine生产. 这种以前被误解的酶在发酵过程中起着关键作用.
科学领域:
- 微生物学和生物技术
- 酶学 是一种酶学.
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- Aspergillus oryzae被用于生产米科吉,一种发酵产品.
- 阿格马丁是一种由氨酸脱碳酶 (ADC) 生产的聚胺.
- 在A. oryzae中,一个以前未被描述的基因被怀疑参与了阿格马丁的产生.
研究的目的:
- 鉴定和描述了负责A. oryzae koji.中阿格马丁生产的酶.
- 为了确定基因AO090102000327的功能.
- 为了研究这种酶在米吉发酵过程中的作用.
主要方法:
- 质谱成像以可视化阿格马丁的积累.
- 使用染色学分离和净化酶.
- 通过LC-MS/MS和基因测序来识别蛋白质.
- 重组蛋白表达和活性测定.
- 西方涂抹以确认酶的表达.
主要成果:
- 在低pH条件下,agmatine被发现会积聚在koji米中.
- 一个基因,AO090102000327,以前标注为酸氨酸脱碳酶 (PSD),被确定为编码阿尔金氨酸脱碳酶 (ADC).
- 纯化的蛋白质,被指定为Ao-ADC1,表现出依赖于pyruvoyl的ADC活性,特别是去碳化氨酸.
- Ao-ADC1表达在米的基质髓中得到证实.
结论:
- 基因AO090102000327编码一个功能性阿尔金因脱碳酶 (Ao-ADC1) 在阿斯伯吉勒斯小虫.
- Ao-ADC1负责在大米中观察到的显著的亚格马丁产量.
- 这一发现纠正了先前的错误注释,并突出了koji发酵中的一个关键酶.
